SERVALНабір EosUltra Western Blot Chemiluminescence HRP Substra Kit - PDF Free Download

1 КЕРІВНИК КОРИСТУВАЧА ПОСЛУГИ EosUltra Western Blot Хемілюмінесценція HRP Комплект підкладки (Кат. №) SERVA Electrophoresis GmbH Carl-Benz-Str. 7 D Гейдельберг Телефон, факс

western

2 Зміст 1. SERVALIGHT EOSULTRA Загальна інформація Компоненти набору Умови зберігання 2 2. ВИКОНАННЯ ВИЗНАЧЕННЯ Важливо на початку Необхідні, не постачаються матеріали та рішення Схема протоколу виявлення вестерн-блот 5 5. ПРОБЛЕМА РІШЕННЯ 7 4. ІНФОРМАЦІЯ ПРО ЗАМОВЛЕННЯ 8 Вер 03/12 1

3 1. СЕРВІСight EosUltra 1.1. Загальна інформація SERVALight EosUltra - це високочутливий хемілюмінесцентний субстрат для виявлення кон'югатів пероксидази хрону (HRP), наприклад мічені антитіла на імуноблоти. Інтенсивність сигналу субстрату дозволяє виявляти антиген у нижньому діапазоні фемтограм (10-15). Переваги: ​​виявлення на плівках або в системах документації, придатних для хемілюмінесценції, наприклад ProXima C16Phi +, Isogen Дуже короткий час опромінення та/або більші розведення антитіл завдяки оптимізованим світлоінтенсивним сигналам SERVALight EosUltra не підходить для діагностики та інших клінічних застосувань, а лише для досліджень та розробок. SERVALight виробляється компанією Cyanagen Srl. Cyanagen Srl є предметом наступних патентів США та ЄС США, ЄП, США, а також вже поданих та відповідно діючих патентів для інших країн Компоненти набору Кат. SERVALight EosUltra розчин для люмінолу SERVALight EosUltra розчин для перекису мл 10 мл мл 50 мл мл 100 мл 1.3. Умови зберігання Зберігати комплект при температурі 2 8 С. Якщо зберігати його при рекомендованій температурі, його можна використовувати принаймні до: див. Етикетку. 2

6 2.3. Схема інкубації блокування електрофорезу за допомогою гелю для виявлення венон-плями 1. Інкубація антитіл 2. SERVELight виявлення інкубації EosUltra 2.4. Протокол (1) Видаліть пляму з апарата для промокання, а потім блокуйте при кімнатній температурі (хв) або при 2-8 ° С протягом ночі. (2) Видаліть блокуючий реагент і додайте перший робочий розчин антитіла у відповідному розведенні. Інкубація протягом 1 години при кімнатній температурі або протягом ночі при 2-8 С зі струшуванням. (3) Подальше промивання мембрани промивним буфером (5 хв). Повторіть крок прання 4-6 разів. Більші обсяги буфера або кількість етапів миття можуть допомогти зменшити фон. (4) Додайте відповідне розведення кон'югату HRP. 1 год інкубації помарки при кімнатній температурі зі струшуванням. (5) Повторіть крок (3). (6) Перед виявленням розчини для виявлення повинні мати кімнатну температуру. (7) Приготуйте робочий розчин субстрату, змішавши рівні пропорції розчину перекису з розчином люмінолу. На см 2 мембрани слід використовувати 0,1 мл робочого розчину. 5

7 (8) Робочий розчин стабільний протягом 24 годин при кімнатній температурі. (9) 5 хв інкубації помарки мембрани з робочим розчином підкладки. (10) Перенесіть захищену кляксу (наприклад, оберніть харчовою плівкою без бульбашок повітря) у касету для плівки білком догори та вставте плівку. Тут вам слід працювати у відповідній темній кімнаті. Під час витримки плівка повинна залишатися сухою. ВАЖЛИВО: Надлишки субстрату слід видалити з помарки. Плівку слід надягати обережно, оскільки через інтенсивність сигналу навіть невелике ковзання плівки/плями може призвести до розмитих або неправильних сигналів. (11) Перш за все, рекомендується час експозиції 60 с. Залежно від потужності сигналу, відповідно може бути обраний подальший час експозиції для оптимальної інтенсивності сигналу. (12) Потім відкривається відкрита плівка. (13) Як альтернатива розробці плівки, виявлення може також здійснюватися за допомогою відповідних систем документації, наприклад ProXima C16 Phi +, Isogen. (14) За потреби блот можна видалити після виявлення та завантажити антитілами. 6-й

9 4. Інформація про замовлення мембран Кат. №. Іммоболон (PVDF), 26,5 см х 3,75 м, розмір пор: 0,2 мкм (1 рулон) 25 см х 3 м, розмір пор: 0,2 мкм (1 рулон) Стандартний протеїн SERVA Western Blot Protein Стандартні реагенти Реагенти для виявлення твіну/Набори Хемілюмінесцентний реагент для пероксидази хрону SERVALight Polaris CL HRP WB Комплект підкладки SERVALight Eos CL HRP WB Субстратний комплект SERVALight Helios CL HRP WB Комплект підкладки