46589310-microbiology-exam-usmf - Завантажити безкоштовно PDF
Короткий опис
Опис
Поняття Поняття мікро або мікроорганізму ганізму ізмів. е. Категорія Категорії таксономічні таксономічні миші, е, типи безклітинних безклітинних та клітинних. повторно Особливо різницею між мікроорганізмами є прокаріотичний та еукаріотичний ізми. Mi/o = мікроскопічні організми (мікронанометри) + водорості, найпростіші, віруси, субвірусні агенти (пріони), мікроскопічні гриби (гриби, гриби) Класифікації Mi/o: фенотипічні (перша спроба - Карл фон Лінне) генотипічні філогенетика (на основі вивчення скам’янілостей або HLA) Таксономічні групи: домен царство галузь клас порядок сімейний рід вид Невидимі таксони всередині виду, що мають певні відмінності: фізіологічний) серовар (структура Ag) патовар (ступінь патогенності) лізовар (чутливість до бактеріофагів) антибіовар (чутливість до АВ) Роль інфраспецифічних таксонів: епідеміологічні маркери! Класифікація мі/о: ацеляльні безклітинні форми (віруси, вірусоїди, пріони) клітинні форми: бактерії = прокаріоти, еубкт 1) G2) G + 3) mico micopl plas asme me (губа (відсутність сайту ПК) археї = прокаріоти, ПК без пептидоглікану, середовище існування в екстремальних умовах еукарія = еукаріоти (гриби, найпростіші) 1
8. Будова Будова бактеріальної клітини. бактеріальний. Перерахувати Перерахувати елемент елементи, які вони постійно постійні (обов’язкові (обов’язкові) orii) та неперманові непостійні ente (необов’язкові (необов’язкові) ii) структурної структури. а. Цитоплазматична мембрана та цитоплазма. Будова, хімічний склад та біологічні функції. Методи виділення. Постійні елементи: постійні: ПК, MCt, Ct, нуклеоїди, рибосоми, мезосоми G + (E, цитохроми) Непостійні елементи: капсула, суперечка, джгутики, фімбрії, плазміди, включення клітин MCt: мозаїчна рідина Співак не має холестерину, містить стерин-подібні молекули гопаноїдів, багатші на прот. ніж еукаріоти численні функції (в еукаріотів, що виконуються органелами) PBP - каталіз транспептидів та синтез ПК пермеат - транспорт prot. система. секреції рецептори Дихальний ланцюг Роль MCt: 1. Напівпроникний бар’єр, селективна проста дифузія, полегшена 2. Пермеат активний транспорт 3. E метаболічна активність 4. Meta Metabo хвороби лізм см енергія енергетична енергія 5. Частина Часткова icip ipaa la diviz división iune neaa celul celular araa 6. Sint Sintez ezaa PG si fos fosfo foli lipi pide delo lor r • •
Компонент: PG (тривимірна) 40-80% змінного струму teichoici (зафіксовано НАГ), ак. ліпотейхойний (фіксований MCt) = полімери рибіту, гліцерол-фосфату; o негативний електричний заряд o передача іонів дія o Ag активація комплементу комплементу o стимуляція секреції цитокінів o міжклітинна адгезія prot. асоційований ПК або Streptococcus pyogenes = прот. M o золотистий стафілокок = прот. A (коефіцієнт скупчення), прот. Рівномірні кріплення для фібронектину Товщина 80 нм
10. Бактеріальна клітинна стінка, функції. Структурні особливості клітинної стінки грамнегативних бактерій. забарвлення
Грам. Техніка і механізм фарбування. Важлива практика. Приклади грамнегативних бактерій. ПК G-:
Компоненти: PG (двовимірна) 1-10% MEx: існування місць спілкування між MEx і MCt роль у транспорті o Prot. мажор: порини, рецептори (пілі, фаги) або прот. мінор: Це захоплення та транспортування субст. LP Braun = об’єднує Mex і PG MEx стабілізація LPZ (найнезвичайніший компонент) MEx стабілізація o Ліпід A - знаходиться в MEx; ендотоксин (стимулює секрецію цитокінів) o Miex PZ - транспортує деяку субстанцію; AgR гендерна специфіка o Lant O (OZ) - негативна вагітність, запобігає фагоцитозу; Видова специфічність AgO N.B. Bct мають здатність модифікувати структуру AgO здатність обманювати імунний захист Неоднорідний Товщина 12 нм Периплазматичний простір: E і prot. виправлено за допомогою MCt Role: гідроліз, синтез ПК, детоксикація (наприклад, бета-лактамази) бета-лактамази) азе
1. Горіхова фіалка Ct фіолетова 2. Змити водою, обробити ґрунтом. Люголь (йод) утворення нерозчинного фіолетово-йодного комплексу фіксація барвника в клітинах 3. Обробка Місця обробки спиртовим спиртом 95% 95% 3
видалення барвника з Bct G- більші пори в PG, більший вміст ліпідів (розчинний у спирті), низький pH кислоти, підтримка барвника в Bct G + менші пори, низький вміст ліпідів спирт зневоднює стінку і зменшує діаметр пор 4. Повторне забарвлення водною фуксією Результат: G-: червоний, G +: фіолетовий Використання плями Грама: Діагностика, чутливість до AB Особливі, осмотично чутливі форми: протопласт = G +, без PG Sferoplast = G-, MCt + MEx, частково без форм PG L = bct ліпід ПК, завдяки АВ, (i) оборотна мікоплазма - позбавлена ПК, осмотично стійка підвищена стійкість MCt; плейоморфна форма o
11. Особливості будови та хімічного складу клітинної стінки кислотостійких бактерій. Забарвлення Зіль-Нельсена.
Мелірування спор: фарбування після AUJESZKY 14. Капсула бактерій. Хімічні композиційні та біологічні функції. Позитивні та негативні методи фарбування капсул. Приклади
Кон'югативні купи - капілярні структури білкової природи, присутні в кількості 1-10 на клітину (кодуються кон'югативними плазмідами F). Роль сполучникових пілі: 5
1. передача переносу ДНК шляхом кон’югації 2. R для деяких бактеріофагів Виділення клітин: електронна мікроскопія 16. Непрямі методи вивчення рухливості бактерій. Приготування рідних страв. Методи обстеження. принцип
мікроскопія чорного тла і кількість фазових розчинів. Вивчення нативних препаратів "крапля по краплі" або "між слайдом" (фазово-контрастна мікроскопія або на чорному тлі). Посів бактеріальної культури в напівтверді середовища (спостерігається помутніння) Зростання культури «в завісу» на поверхні твердого середовища 17. Грануляції волютину. Хімічний склад та біологічні функції. Методи мелірування. Фарбування за Леффлером та Нейссером.
19. Морфологія та ультраструктура мікоплазм та хламідій. Методи дослідження. Патогенні види. Мікоплазми - це бактерії: обмежені лише триламінованою мембраною і не мають жорсткої клітинної стінки, а також генетичної інформації, необхідної для синтезу специфічних для стінок попередників. Малі та поліморфні форми Його культивують на безклітинних середовищах, а культуру інгібують специфічні антитіла. Він розмножується в циклі, який по черзі включає подовження та фрагментацію ниткоподібних форм на кокоїдні форми та їх поділ. Досліджується залежно від локалізації інфекції, мокротиння або ексудату носоглотки, сечі, взятої за допомогою лапароскопії тазу. Пряма мікроскопія ні до чого, звичайне фарбування не може виявити мікоплазми через свої невеликі розміри. а імунофлуоресцентне фарбування не дало задовільних результатів. Ізоляція та ідентифікація. Забарвлення дієн, колонії мікоплазм забарвлені у фіолетовий колір і покриті ламелями, можна дослідити зануренням. •
Консерванти. Асептика означає захист від мікроорганізму. Антисепсис означає знищення мікроорганізмів на поводжувальних інструментах. Фільтрація - це проходження рідини через пористе тіло - фільтр, фільтри з зручною пористістю дозволяють позбутися відфільтрованого рідинного мікроорганізму, який утримується механічно та електростатично в порах фільтра. Застосовується для стерилізації повітря, поживних середовищ мікробів, ліків, які не витримують нагрівання. Типи фільтрів: Класичний порцеляновий, або земля-заварка у формі порожнистих свічок з внутрішньої сторони і закрита з одного кінця (пробки фільтра) азбестові фільтруючі пластини, просочені каоліном (фільтр Сейца або пористе скло (фільтр Шотта). ацетат целюлози з пористістю від 8 до 0,025 мкм. Фільтрація проводиться аспірацією або позитивним тиском (пристосований до шприца). Щоб уникнути закупорки пір, суспензії з високою щільністю частинок попередньо фільтрують волокнистим або гранульованим матеріалом. хімічні речовини) Речовини, що використовуються для зберігання препаратів 7
Речовина Область застосування Концентрація% Фенол Імунні сироватки, Вакцини 0,3-0,5% Мертіолат натрію Імунні сироватки, ін’єкції 0,004-0,02 Фенол + Мертіолат Імунні сироватки, Очні краплі 0,2 + 0,005; 0,002 + 0,01 Бензоат натрію Мазі, емульсії, їжа 0,2-1 Збереження фізичними речовинами: Пастеризація - Нагрівання до 62-85 ° руйнує вегетативні форми, а не спори. Негайне охолодження при температурі 4 ° C за допомогою теплового удару завершує мікробіцидний ефект. Широко застосовується охолодження при температурі 4 ° C. Заморожування - мінімальний антимікробний ефект при охолодженні під точкою евтектики (-21,3 ° C) запобігає утворенню кристалів льоду. Або в рідкому азоті (196 ° C). Ліофілізація - десикація використовується в мікробіології для невизначеного збереження штамів деяких спороносних бактерій. Ліофілізація використовується для збереження мікроорганізмів, імунних сироваток та біологічних реагентів. По суті, це кріодезик. 23. Мікробний обмін речовин. Особливості. Бактеріальні ферменти. Класифікація, роль у фізіології мікробів. Практичне застосування
за типом дихання. Приклади. Класифікація бактерій за джерелом енергії фототрофи - використовують сонячну енергію (фотосинтез) хемотрофи - використовують енергію, що виділяється в результаті хімічних окисно-відновних реакцій. Вони потребують донорного субстрату водню (e- та H +) та акцепторного водню субстрату. 8
хемолітотрофи - донор H = неорганічна речовина хемоорганотрофи - донор H = органічна речовина (глюкоза, ліпіди.) • Патогенні бактерії є хемоорганотрофними Механізми отримання енергії в хемоорганотрофах залежно від кінцевого акцептора H: Аеробне дихання. Кінцевим акцептором є газ кисень. Включає асоційований з MCt ланцюг дихальних електронів. Кінцевий продукт - H2O або H2O2. Анаеробне дихання. Кінцеві акцептори - неорганічні сполуки (нітрат, сульфат, S). Транспорт електронів через дихальний ланцюг. Кінцеві продукти - нітрит, аміак, сульфід (у присутності O - H2O2). бродіння. Органічний субстрат метаболізується без втручання зовнішнього окислювача. Він складається з оксидно-червоних процесів, які здійснюють лише часткове окислення субстрату, донором і акцептором Н + є органічні речовини. Це призводить до зменшення субстрату до більш окисленої молекули (наприклад, молочнокисле бродіння, спиртове бродіння, змішана кислота, ацетоїнова кислота тощо). Ферментація може відбуватися у присутності O2, але без його втручання. Класифікація бактерій за джерелами енергії та вуглецю: фотоавтотрофи (сонячна енергія, CO2); фотогетеротроф (англ. sol., subst.org); хемоавтотрофний; хемогетеротрофні (хемолітогетеротрофні, хемоорганогетеротрофні). •
26. Ріст і розмноження бактерій. Фази розмноження періодичних (розривних) культур бактерій. Культура бактерій
рідкі та тверді середовища. MC = тверді розчини/субстрати, забезпечує поживні речовини та фізико-хімічні умови для вирощування bct. Їх можна використовувати для: культивування (виділення) бактерій; Тестування чутливості АБ; зберігання або транспортування бакреанських культур. Вимоги до MC: а) Поживні та енергетичні потреби bct 9
оптимальна вологість, оптимальний рН (7,2-7,4) та постійний (буферний характер) оптимальний окисно-відновний потенціал (анаеробний - rH210) ізотонічний (0,5% NaCl) стерильний та прозорий
28. Бактеріологічний метод у діагностиці інфекційних захворювань. Мета. Взято у пацієнтів та навколишнього середовища. Принципи
IV етап - ОЦІНКА РЕЗУЛЬТАТІВ, ФОРМУЛЮВАННЯ ТА ВИПУСК ВІДПОВІДІ
Новобіоцин Новобіоцин, хінолони (налідиксова кислота, ципрофлоксацин, офлоксацин) - блокують активність топо-ізомераз, втручаючись у конформацію ДНК. Бактерицидна дія. Сульфаміди та триметоприм порушують синтез фолієвої кислоти та фолатів (кофактори в синтезі АН). Бактеріостатична активність. Виробництво АВ: АВ: Біологічний метод; Синтетичний метод; Напівсинтетичний метод Етапи біологічного методу: 1. Вирощування продукуючих штамів (наприклад, Penicillium notatum, Actinomyces griseum та ін.) У відповідному рідкому середовищі 2. Екстракція АВ 3. Очищення та концентрація АВ 4. Контроль токсичності 5. Визначення активності АБ АВ вимірюється в одиницях маси (г, мг, мкг) або дії (АС). 1 AU - мінімальна кількість AB, що пригнічує ріст еталонного штаму в стандартних умовах. Пеніцилін - 1UA = 0,6 мкг чистої речовини Вимоги до АБ: Селективна токсичність; Терапевтичний ефект при мінімальних дозах; Тривала діяльність; Вузький спектр дії; Бути розчинним і легко всмоктуватися; Не викликають побічних ефектів; Не виробляти стійкості до АВ; Будь дешевим
34. Поняття чутливих, проміжних та стійких до антибіотиків штамів бактерій. Методи визначення чутливості
антибіотики до антибіотиків: дифузіметрія (шайби), послідовне розведення. Поняття мінімальної концентрації гальмування (MIC) та мінімальної бактерицидної концентрації (CMB). Чутливість мікробів до АБ Залежно від клінічних результатів бактерії поділяють на 3 класи: чутливі до АВ (S), стійкі (R) та проміжні (I, помірно чутливі). Штами S - терапевтичний ефект досягається за допомогою звичайних терапевтичних доз Штами R - терапевтичний ефект неможливо отримати за допомогою терапевтичних доз Штами I - терапевтичний успіх непередбачуваний. Це було б можливим при застосуванні високих доз або при місцевому введенні АБ. Кожен ізольований штам демонструє особливу чутливість. Його можна вивчити в лабораторії, щоб визначити профіль чутливості цього штаму, який є антибіограмою. Тестування бактеріальної чутливості за методом АБ дифузії (шайби). Зазвичай використовується при поширених інфекціях. a