Фактор некрозу пухлини (tnf альфа) Синево Молдова

Повідомтетii загальне та рекомендації щодо визначення ФНО-α

TNF (фактор некрозу пухлини) - це прозапальний цитокін, назва якого походить від здатності руйнувати пухлинні клітини та індукувати геморагічний некроз у пухлинах, трансплантованих мишам 5 .

TNF-α (казектин) та TNF-β (лімфотоксин) спочатку описували як цитотоксичні фактори, що виробляються макрофагами та лімфоцитами, відповідно; Згодом було встановлено, що TNF-α та TNF-β є двома білками, які виявляють гомологію до 34% амінокислотних послідовностей 3; 5. Обидва медіатори діють на клітини-мішені через однакові рецептори і з цієї причини мають схожі, але не однакові біологічні ефекти.

Ген TNF-α знаходиться в хромосомі 6. В умовах денатурації TNF-α є неглікозильованим білком 17 кДа. Біологічно активною формою TNF-α є тример. На додаток до цієї розчинної форми існує також мембранно-зв'язана форма (28 кДа), розташована на поверхні клітин, що продукують ФНО, і яка служить пулом для розчинної форми, утвореної протеолітичним розщепленням 3 .

TNF-α продукується не тільки макрофагами та моноцитами, але також лімфоцитами, тучними клітинами, нейтрофілами, кератиноцитами, астроцитами, мікроглією, клітинами гладких м’язів та деякими клітинними лініями пухлини 5. Велика кількість TNF виділяється при контакті макрофагів, CD4 + Т-лімфоцитів та клітин природних кілерів (NK) з ліпополісахаридами, продуктами бактерій та інтерлейкіном 1 3 .

TNF-α діє безпосередньо через два різні поверхневі рецептори, звані TNFR I і TNFR II, що мають різну молекулярну вагу 3, 4, 5. Ці рецептори можна ідентифікувати на всіх типах клітин, крім еритроцитів. Частини цих рецепторів розщеплюються протеазами і потрапляють до позаклітинного середовища, утворюючи розчинні рецептори; вони діють як ендогенні інгібітори TNF-α і, таким чином, регулюють рівень позаклітинного TNF-α 4 .

Зв’язування з рецепторами TNF-α призводить до конформаційних змін у структурі рецепторів, що призводить до каскадної активації транскрипції інших білків, що беруть участь у проліферації клітин, запальній реакції та клітинному апоптозі. TNF-α може мати місцеву паракринну дію (місцеве підвищення концентрації TNF може спричинити основні ознаки запалення: почервоніння, біль, нагрівання та набряк) або може діяти на відстані, як ендокринні гормони 5. Завдяки присутності своїх рецепторів у більшості тканин TNF-α чинить широкий спектр біологічних ефектів:

цитолітичний та цитостатичний вплив на клітини пухлини;
хемотаксична дія на нейтрофіли 3;
підвищує проникність ендотеліальних клітин в області із запаленням; вони не тільки викликають накопичення імунних клітин, але й впливають на процес згортання;
активізує різні обмінні процеси в м’язових клітинах і адипоцитах, забезпечуючи енергію, необхідну для запальної реакції 1;
на рівні макрофагів стимулює фагоцитоз і вироблення простагландину Е2;
інсулінорезистентність зростає в інших тканинах;
активізує остеокласти, тому стимулює резорбцію кісток;
є фактором росту фібробластів і стимулює синтез колагенази;
посилює проліферацію Т-лімфоцитів після стимуляції інтерлейкіном 2 3;
викликає анорексію та лихоманку, діючи як ендогенний піроген 1;
відповідає за синдром кахексії, пов'язаний зі злоякісними процесами та більшістю паразитарних інвазій 5 .

Визначення сироваткового TNF-α є маркером системної запальної реакції (SIRS), пов’язаної з сепсисом, травмою та серцевою недостатністю. Деякі дослідження показали зв'язок концентрації TNF-α у спинномозковій рідині зі ступенем активності при розсіяному склерозі; з іншого боку, визначення TNF-α може бути корисним для диференціації бактеріального менінгіту від інших причин менінгіту 1 .

Дослідження на тваринах показали, що TNF-α бере участь у патогенезі ревматоїдного артриту та запальних захворювань кишечника завдяки своєму прозапальному ефекту шляхом активації ендотеліальних клітин та індукції хемотаксису нейтрофілів. З цієї причини лікування цих станів також включає інгібітори TNF-α: або моноклональні антитіла до TNF-α (інфліксимаб, адалімубаб), або злиті білки рецепторів антитіл, відповідно TNFRII-IgG1 (етанерцепт) 5 .

Рівень TNF-α може бути використаний для діагностики імунних розладів та моніторингу лікування лише у взаємозв'язку з додатковими клінічними та параклінічними даними 2 .

Навчання пацієнта - натщесерце (натщесерце) або після їжі 2 .

Зібраний зразок - кров прийде 2 .

Збиральний контейнер - пилосос без антикоагулянта, з/без розділювального гелю 2 .

Кількість зібраного - мінімум 0,5 мл ser 2 .

Причини відхилення доказів - інтенсивно гемолізований, жовтяничний, ліпемічний або бактеріально забруднений зразок; зразки, які не надійшли до лабораторії замороженими 2 .

Необхідна обробка після збору врожаю - сироватку відокремлюють центрифугуванням якомога швидше після повного утворення сиру, і зразок негайно заморожують при -20 ° C; зразки, зібрані поза лабораторними пунктами, транспортуються до контейнера, призначеного для заморожених зразків 2 .

Перевірка стійкості - сироватка стабільна протягом 1 місяця при -20 ° C; не розморожувати/заморожувати 2 .

Метод - імуноферментний аналіз EIA 2 .

Довідкові значення 1 - 2 .

Інтерпретація результатів

Підвищений рівень TNF-α реєструється при сепсисі, травмах, аутоімунних та хронічних запальних захворюваннях (ревматоїдний артрит, анкілозуючий спондиліт, хвороба Крона, псоріаз), інфекційних захворюваннях та відторгнення трансплантата 2 .

1. Ганс Д. Волк, Герно Кейзер, Герд Р. Бурместер. Цитокіни та рецептори цитокінів. У клінічній лабораторній діагностиці - використання та оцінка результатів клінічної лабораторії. Лотар Томас. TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Франкфурт-на-Майні, Німеччина, 1-е вид. 1998, 764-772.

2. Синевська лабораторія. Конкретні посилання на використовувану технологію роботи 2010. Тип посилання: Каталог

3. Лабораторна корпорація Америки. Каталог послуг та тлумачний посібник. Фактор некрозу пухлини-α. www.labcorp.com 2010. Тип посилання: Інтернет-спілкування.

4. Магда Блек. Запалення. В основах ревматології. Видавництво Amaltea, 2007, 56.

5. Річард А. Мак-Петерсен, Метью Р. Пінкус. Імунологія та імунопатологія. У клінічній діагностиці та менеджменті Генрі лабораторними методами - Sauders Elsevier 21st Ed Ed 2007, 867.