Копрокультура (з антибіограмою відповідно) - Синево
Інформованийii загальний
Діарейний синдром, за частотою, є третім синдромом, який зустрічається в медичній практиці.
Хоча більшість пацієнтів мають самолімітуючу інфекцію, існують також важкі форми, що характеризуються частим стільцем (3-40/добу), низькою консистенцією (іноді водянистою), з великими втратами рідини, що може призвести до гідроелектролітичного дисбалансу, що супроводжується важкими порушеннями гемодинаміки ( серцево-судинний колапс), що спричиняє смерть.
Лямблії лямблій, Cryptosporidium parvum, Entamoeba histolytica 1; 3
- Патогенні ентеробактерії: Salmonella spp., Shigella spp., Escherichia coli ентеропатоген, ентеротоксиген, ентерогеморагічний, ентероінвазивний, ентероадентальний, ентероагрегативний, Yersinia enterocolitica 1; 3
- Патогенні кондиціоновані ентеробактерії: Klebsiella spp. (Синдром діареї новонародженого), Serratia marcescens ("синдром червоної пелюшки" - внаслідок аномальної колонізації цією бактерією у новонароджених)
- холерний вібріон, Vibrio parahaemoliticus
- Високо грамнегативні палички: Aeromonas, Alcaligenes, Plesiomonas
- грампозитивні коки: золотистий стафілокок 1; 3
Анаеробна бактерія
Bacillus cereus, Clostridium difficile (псевдомембранозний ентероколіт після антибіотикотерапії), Clostridium perfringens, Clostridium botulinum 1; 3
мікроаерофіль
Вірус Norwalk, ротавірус, аденовірус 1; 3
Збір та транспортування зразків
Відбір проб слід проводити якомога ближче до початку захворювання та до початку будь-якого протимікробного лікування.
• Відмова від спонтанно виділеного стільця - кращий і показаний при всіх формах гострої діареї, коли виділення калу часті.
• Для бактеріальних та паразитарних досліджень відбір проб проводять за допомогою «чайної ложки» комбайна, націлюючи на порції рідини та, особливо, на слизові та/або кров’яні, якщо такі є. Об'єм врожаю повинен бути не менше 5 мл або 3-5 см 3, якщо стілець утворений 3 .
• Для ізоляції або вірусологічних досліджень береться 5-10 см 3 фекалії або не менше 5 мл, якщо стілець не утворюється 3 .
• Ректальний забір - рекомендується у:
- хронічний шигельоз, коли зішкріб слизової прямої кишки зондом або тампоном забезпечує більші шанси на ізоляцію;
- розслідування носіїв шигел та сальмонел, крім С. Тифі.
Для цього типу відбору проб використовуються зонди Nelaton (№ 14-16) або відповідні тампони, наступним чином: тампон, змочений в ізотонічному сольовому розчині (не використовуйте мастильні гелі), повільним обертанням проникає в анальний сфінктер внутрішньоректально близько 15 см. Те саме буде зроблено з зондом Nelaton, до якого пристосований шприц (10 мл), за допомогою якого проводиться 1-2 аспірації. Після збору зонди та мазки поміщають у стерильні контейнери, що містять консерванти, відповідно маркують та відправляють у лабораторію. .
Транспорт зразки та їх обробка проводиться максимум за 1 год, якщо вони були зібрані в контейнери без транспортного середовища (при транспортуванні при кімнатній температурі), або їх можна зберігати до 24 год при кімнатній температурі, якщо вони були зібрані в контейнери, що містять Транспортне середовище Кері-Блера, яке забезпечує хорошу життєздатність бактеріальних кишкових збудників. Винятками з цих правил є зразки, відібрані за підозрою на зараження Shigella spp, дуже чутливою бактерією, яка вимагає інокуляції на культуральне середовище відразу після відбору проб 3; 4 .
Для вірусної етіології зразки, які не обробляються негайно, слід зберігати при - 70 ° C 3 .
Виділення аеробних бактерій
• Висійте зразок на два культуральних середовища, один слабоселективний (Mac Conkey) і один помірно селективний (Hektoen), та інкубуйте протягом 24 годин при 35-37 ° C, слідуючи за культурами через 24 та 48 годин для появи характерних колоній. Для роду вібріон рекомендованим селективним середовищем є BSA (жовчно-сольовий агар), а для дріжджів - середовище Sabouraud з левоміцетином.
• Для збільшення шансів ізоляції зразок пересівають на збагачувальні середовища, які сприяють розмноженню патогенних мікроорганізмів (наприклад, відвар селеніту натрієвої кислоти для Salmonella spp., Лужна пептонова вода або бульйон з тауроколатом та пептоном при рН = 8,0-9, 0 для вібріону, звідки після інкубації можна проводити мазки та посіви з верхнього середовища). Інкубуйте протягом 24 годин при 35-37 ° C, потім пропустіть через культуральне середовище.
• Колонії, характерні для кожного роду, будуть пересаджені для ідентифікації видів та аглютинації із специфічними сироватками.
Дріжджова ізоляція
• на мазках, забарвлених по Граму, відстежується наявність дріжджів у великій та переважній кількості порівняно зі зменшеною каловою бактеріальною флорою 2 .
• є визначальним для вирощування фекалій з метою виділення та кількісної оцінки дріжджів.
Вирощування на середовищі Сабуро левоміцетином з подальшим спостереженням через 48–72 год 3 .
Для того, щоб встановити грибкову етіологію діарейного синдрому, буде проведено кількісне дослідження дріжджів, відповідно визначення кількості одиниць грибоутворюючої колонії на г або мл фекалій, істотно кількісною є кількість> 10 9 КУО/г або мл фекалій 3 .
Комунікація та інтерпретація результатів
У разі звернення до служби співпраці в лабораторії аналізуються основні бактерії, що беруть участь у діарейній хворобі: Shigella spp., Salmonella spp., А у дітей віком 0-3 років та діарейний патотип ентеропатогену кишкової палички - EPEC 5 .
Заява на кишкову паличку для дітей старше 3 років та дорослих, EHEC (Escherichia coli enterohemorrhagic) та EIEC (Escherichia coli enteroinvasive) подаватиметься лише за направленням лікаря, у якого зазначена клінічна підозра.
У ситуаціях, коли бажане дослідження фекалій на види Candida, запитувана послуга повинна бути "Культура та ідентифікація фекальних грибів".
Ми також згадуємо, що в наших лабораторіях не проводять посів вірусів 2 .
Бібліографія
1. Бетті А. Форбс, Даніель Ф. Сам, Аліса С. Вайсфельд. Інфекції шлунково-кишкового тракту. У діагностичній мікробіології Бейлі і Скотта. Мосбі, США, 11-е вид. 2002; 62, 965-969.
2. Синевська лабораторія. Конкретні посилання на використовувану технологію роботи 2010. Посилання. Каталог типів.
3. Маріан Негут. Лабораторна діагностика при синдромі інфекційної діареї. У «Трактаті з клінічної мікробіології». Думітру Буюк, Маріан Негуц, Медичне видавництво Румунії, 1-е видання. 1999, 349-386.
4. Річард Б. Томсон Дж., Дж. Майкл Міллер. Збір, транспортування та обробка зразків: бактеріологія. У посібнику з клінічної мікробіології. Патрік Р. Мюррей та ін., ASM PRESS, США, 8-е видання. 2003; 20, 312-313.
5. Ненсі А. Строкбін та ін. всі. Ешерихії, шигели та сальмонели. У посібнику з клінічної мікробіології. ASM PRESS, США, 11-е видання 2015 р .; 37: 685-713.