Перша ідентифікація діуретику (гідрохлоротіазиду) в аплікації для волосся на футлярі

Визначити та визначити кількісно гідрохлортіазид, діуретик, у волоссі спортсмена з ненормальним результатом у сечі та визначити, чи відповідає виявлена концентрація одноразовому або повторному впливу.

Вступ

Випускається окремо (Esidrex ®) або в поєднанні з іншими молекулами, гідрохлоротіазид є діуретиком із сімейства бензотіадіазинів, що використовується для лікування високого кров’яного тиску. Він пригнічує реабсорбцію натрію та збільшує екскрецію сечі. Завдяки своїй сечогінній силі, гідрохлоротіазид може використовуватися певними спортсменами для схуднення (спорт у ваговій категорії) або для швидшого виведення анаболічних або стимулюючих речовин. Всесвітнє антидопінгове агентство класифікує його як заборонену речовину (клас S5. Діуретики та маскуючі речовини).

Приклад

Ми повідомляємо про випадок елітного плавця з ненормальним результатом для гідрохлоротіазиду в сечі (порядку пг/мл). Спортсмен заперечує результат і заперечує добровільне вживання препарату. Однак він визнає, що ненавмисне використання можливе, оскільки його друг перебуває на гідрохлортіазиді. Лабораторії було доручено провести дослідження волосся, щоб встановити профіль споживання.

Методи

На сьогоднішній день жоден метод ідентифікації діуретиків у волоссі не опублікований, і тому бібліографічні посилання відсутні. Для того, щоб мати можливість інтерпретувати результати та отримати інформацію щодо виявлення гідрохлоротіазиду у волоссі, чотирьом здоровим добровольцям чоловічої статі перорально ввели 25 мг таблетки Esidrex ® і волосся зібрали через місяць. Виставка. Крім того, у це дослідження було включено десять добровольців, які проходили терапевтичне лікування (дози 6,5–12,5 та 25 мг на день). Конкретний кількісний метод був розроблений за допомогою рідинної хроматографії в поєднанні з тандемним мас-спектрометром (LC-MS/MS). Після інкубації (50 ° C, 15 год) при рН 7,0 і додавання гідрофлуметиазиду, що використовується як внутрішній стандарт, зразок екстрагують 5 мл етилацетату, потім випаровують і відбирають у 50 мкл рухомої фази (95/5, об./об., вода + 1 мМ ацетат амонію/МеОН + 1 мМ ацетат амонію). Переходи, що використовуються для гідрохлоротіазиду, складають m/z 296,1> 268,9 (кількісна оцінка) та 296,1> 204,9 (підтвердження), а для гідрофлуметиазиду m/z 329,8> 302,9.

Результати

Калібрування проводили на негативному волоссі. Діапазон від 5 до 2000 пг/мг є лінійним з коефіцієнтом кореляції 0,995. Межа кількісного визначення становить 5 пг/мг. Аналіз сегмента 0–2 см у 4 добровольців є негативним на межі кількісної оцінки. Встановлено, що волосся десяти пацієнтів (2 см), які отримували щоденне лікування, були позитивними з концентраціями від 12 до 1845 пг/мг, без співвідношення між добовою дозою та концентрацією. Волосся спортсмена, сегментоване на 3 × 2 см, демонструвало концентрацію гідрохлоротіазиду 36 пг/мг у сегменті, що відповідає періоду контролю сечовиділення.

Висновок

Вперше у волоссі виявлено діуретик (гідрохлоротіазид). Молекула пов'язується погано, ймовірно, через її слабокислу властивість і без кореляції між дозою та концентрацією. Оскільки одноразовий вплив неможливо ідентифікувати у волоссі та на підставі результатів пацієнтів, які перебувають на щоденному лікуванні, концентрація, виявлена у спортсмена, трактується як відповідна повторному впливу, без можливості встановити дозу та частоту споживання.

Попередній стаття у випуску Далі стаття у випуску