Вибір ембріона
Ембріональна культура
В кінці 48 годин інкубації зовнішній вигляд заплідненої яйцеклітини вже зовсім інший. Він складається з декількох клітин і оточений конверт, який називається zona pellucida.
Це вже ембріон, який можна перенести в материнську матку. Ендометрій (внутрішня оболонка матки) підготувався до можливого зародка.
В кінці запліднення, яйце ділиться на 2 клітини, потім 4, потім 8 і так далі. Через тиждень буде близько 200 клітин. Потім ці клітинні поділи продовжуватимуться, забезпечуючи тисячі клітин, які об’єднаються, щоб сформувати контури майбутніх органів.
Усі ці стадії, починаючи з 1-го дня (2 клітини) і закінчуючи 2-м місяцем, називаються ембріоном. Згодом ми говоримо про плід, у якого поступово попередні обриси перетворюються на кінцеві органи (мільярди клітин).
| Зигота (запліднений ооцит) | Через 24 години після запліднення | ||
| 2 клітини | Через 30 годин після запліднення | ||
| 4 клітини | Через 40 годин після запліднення | ||
| 8 клітин | Через 60 годин після запліднення | ||
| Морула | Через 96 годин після запліднення | ||
| Бластоциста | Через 5 днів після запліднення |
На практиці при ЕКО це перші ембріональні стадії, які спостерігаються: через 2 дні після присутності гамет це етапи з 4 клітинами в середньому.
Але культуру можна продовжити максимум на 7 днів до стадії бластоцисти.
Через 2 дні при 20% спроб немає зародка.
Через 7 днів при 35-40% спроб цього не відбувається бластоциста.
Причинами нежиттєздатності ембріона є:
• наявність будь-яких хромосомних відхилень,
• зрілість ооцитів, які їх забезпечили,
• можливо якість сперми.
Система класифікації ембріонів на D2
Дуже недосконало, через 2 дні культури, з огляду на їх морфологічний вигляд, можна ідентифікувати зародки з незрілих ооцитів. Це на цьому етапі досить мінливо і ми можемо це описати без пошкодження клітин: кількість, розмір, форма, зовнішній вигляд клітин, зовнішній вигляд оболонок, зона пелюції та купчаста хмара, їх фрагментація тощо.
Морфологія ембріона на D2 є найбільш часто використовуваним параметром протягом більше 25 років.
Нам вдалося визначити „ідеальний” ембріон та різні варіанти, які більш-менш віддалені від нього; і ми можемо приблизно класифікувати їх відповідно до оцінки:
Оцінка, що використовується в лабораторії Eylau La Muette
1-а цифра: кількість клітинок
Через 48 годин ембріон зазвичай має 4 клітини, інші - 2,3 або 5.
Рейтинг - кількість клітин: 4 клітини через 48 годин, 8 клітин через 72 години ...
2-а цифра: регулярність клітин
Наприклад, клітини (бластомери) 4-клітинного ембріона повинні бути однакового розміру.
Рейтинг - 1 для типового ембріона і 2 для нетиповогоe. Буква Т також використовується для типового, а буква А - для атипового.
3 цифра: ступінь роздробленості
Під час поділу клітин можуть утворюватися фрагменти (невеликі шматочки клітин). Коли ембріон має фрагментацію понад 50%, його шанси на розвиток та імплантацію зменшуються.
1: Швидкість дроблення менше 10%
2: рівень фрагментації від 10% до 50%
3: рівень фрагментації від 50% до 80%
4: рівень фрагментації більше 80%
Таким чином, ембріонвідмінна якість, звичайні клітинні та нефрагментовані будуть оцінені 411, з іншого боку, ембріон низької якості з 4 неправильними та фрагментованими клітинами буде відзначений 423 або 424.
4-бальний ембріональний бал, що використовується при IMR
| Розділені ембріони | |
| Так | 1 бал |
| Ні | 0 балів |
| Стадія поділу клітини | |
| 4 клітини | 1 бал |
| Інші етапи | 0 балів |
| Неправильні комірки (розмір або форма) | |
| Відсутність | 1 бал |
| Присутність | 0 балів |
| Фрагментація (більше або дорівнює 20%) | |
| Відсутність | 1 бал |
| Присутність | 0 балів |
Швидкість імплантації за оцінкою (ретроспективне дослідження):
Оцінка ембріонів 1: 4%
Оцінка ембріонів 2: 8%
Оцінка ембріонів 3: 12%
Оцінка ембріонів 4: 16%
У біологічному звіті про вашу спробу буде зазначено якість перенесених ембріонів та використаний бал.
Біолог ЕКО відповідає за гамети, довірені йому подружжям, та зародки, які можуть у них виникнути.
Він бере на себе відповідальність за всі біологічні стадії ЕКО. На підставі зроблених спостережень він приймає необхідні рішення: вибір ембріонів для перенесення та зародків для заморозки.
Він вирішує з клінічною групою та парою кількість ембріонів для передачі.
Не соромтеся запитувати у біолога подробиці щодо забивання ембріонів.
Ви також можете попросити копію біологічний звіт зроблений під час вашої спроби, і який буде детально описувати розвиток кожного ембріона день за днем.
З цього огляду можна дізнатися багато нового.
Тривала культура
Прогрес, досягнутий у галузі культурних засобів масової інформації, дав змогу розвивати тривала культура.
Запліднений ооцит може розвинутися в лабораторії Від 5 до 6 днів, тобто на етапі бластоциста.
На практиці навряд чи наполовину запліднені ооцити досягають цієї стадії
Однак при тривалій культурі відбирається значна частина життєздатних ембріонів:
Також називається кокультура, це дозволяє культивувати ембріони протягом 5/6 днів до стадії бластоцисти. Перевага в тому лише найкращі досягають цієї стадії і що вони є краще синхронізовано з фізіологічним процесом. Їх рівень успіху вищий. Отже, це дає можливість перенести лише один ембріон.
Деякі центри практикують це частіше за інших. Це часто пропонують, якщо хворий молодий, якщо це його перша спроба і якщо кількість ембріонів це дозволяє.
Там теж a оцінка була створена для вибору найкращої бластоцисти:
Оцінка бластоцисти
Найбільш широко застосовувана класифікація бластоцист включає 6 стадій:
- B1: бластоциста, в якій порожнина рідини (бластоцель) становить менше 50% поверхні ембріона,
- В2: бластоцель, що становить більше 50%,
- B3: повна бластоциста,
- В4: розширена бластоциста,
- B5: висиджування бластоцисти,
- B6: вилупилася бластоциста.
Ці етапи завершуються a Оцінка:
З ембріональна кнопка (Від A до D залежно від згуртованості його клітин)
З трофобласт (Від A до D також залежно від згуртованості його клітин).
В ідеалі ембріони переносяться на сцену B4AA, тобто через 5 днів після фолікулярної пункції.
Ембріоскоп або зйомка зображень у режимі реального часу (Timelapse)
В даний час лише кілька французьких центрів оснащені ембріоскопом
Ембріоскоп - це інкубатор ембріонів в яку вбудована система захоплення зображення що дозволяє постійно контролювати ембріональний розвиток.
Завдяки цій технології це тепер можливо переглянути ембріон у будь-який час, з моменту запліднення до моменту внутрішньоутробного переносу.
У традиційних інкубаторах моніторинг ембріонів здійснюється за допомогою оптичного мікроскопа, саме тому необхідно витягувати ембріони з інкубатора. Це спричиняє переривання умов його вирощування.
Щоб уникнути негативного впливу, який це може мати на ембріони, спостереження за останніми обмежується конкретним періодом і, отже, надає обмежену інформацію про ембріон.
До цього часу ембріональна класифікація проводилася на основі інформації, отриманої за цей період. Однак було помічено, що ембріони, які, здається, мають хорошу морфологію, можуть представляти аномалії під час свого розвитку, такі як наявність множинного зародження або затримка першого поділу, але все ще непомічене при мікроскопічному спостереженні. Ці відхилення можуть зменшити імплантаційну здатність ембріонів.
Перевагами цієї нової системи ембріоскопів є, з одного боку, моніторинг ембріонів не виймаючи їх інкубаційного середовища, таким чином забезпечуючи краща стабільність вологості та температурних умов.
З іншого боку, отримання кращої інформації про ембріональний розвиток, таким чином, дозволяє кращий вибір ембріонів.
Недавнє дослідження показало, що воно покращує рівень успішності народження ЕКО на 56%.
Штрихування (допоміжне виродження ембріонів)
Приблизно в кінці п'ятого дня ембріон вивільняється з zona pellucida (захисна оболонка), яка її огортає. Зародок розриває цю оболонку через серію скорочень розширення. Їй допомагають ферменти, які руйнують zona pellucida на антиембріональному полюсі (полюс навпроти ембріона). Ці ритмічні скорочення розширення дозволяють ембріону вирватися з жорсткої оболонки. Це називається штрихуванням.
Здається, що деякі ембріони мають більш товсту зону пелюціди, ніж інші, які могли б перешкоджати спалаху.
A невеликий отвір на зоні pellucida робиться для того, щоб полегшити процес імплантації.
Ця методика застосовується лише в тому випадку, якщо спостерігається або підозрюється аномалія на zona pellucida або коли численні переноси нічого не дають.
Під час ЕКО зазвичай отримують кілька ембріонів Питання про номер ембріонів, які слід переносити при кожній спробі в матку майбутньої матері, є досить делікатним.
Потрібно знайти компроміс між двома вимогами: максимізувати шанси завагітніти, але зменшити ймовірність того, що це станеться багатоплідна вагітність.
Майже 20% вагітностей після ЕКО призводять до народження двійнят, тоді як цей показник становить лише близько 1% для спонтанних вагітностей. Однак багатоплідна вагітність становить ризик щодо перинатальної смертності, недоношеності та неврологічних наслідків.
У Франції консенсус є перенесення 2 ембріонів максимум, за винятком 3 ембріонів у разі повторної відмови імплантації ембріона.
У молодих пар під час першої чи другої спроби передача а одиночний ембріон систематично заохочується, якщо це дозволяє медична карта.
Після вибору ембріона (ів) відбувається Перенесення ембріонів