Незалежна гіперкальціємія ПТГ та немеланомний рак шкіри; Журнал «Гален»

цілі
1. Оцінка взаємозв'язку між агресією пухлини та гіперкальціємією у хворих на немеланомний рак шкіри;
2. Виявлення клінічних, функціональних, біологічних змін, спричинених цим станом;
3. Перерозподіл кальцію з позаклітинних рідин у внутрішньоклітинні компартменти;
4. Опис декількох молекулярних аспектів розвитку гіперкальціємії.

немеланомний

Матеріали і методи
Це дослідження було проведено в період з січня 2000 року по травень 2009 року в Центрі дерматовенерології, Бухарест. З 1232 досліджених випадків було 32 пацієнти з кератоакантомою, 468 - з базаліомою, 412 - з плоскоклітинним раком і 320 здорових добровольців. Всіх пацієнтів перевіряли клінічними та параклінічними обстеженнями (біохімія, гематологія, імунологія). Після біохімічного підтвердження гіперкальціємії пацієнти проходили ендокринні тести, електрокардіографію та візуалізацію. Загальний кальцій у сироватці крові вимірювали з позаклітинних рідин (сироватка, сеча) за допомогою спектрофотометричних методів. Іонізований кальцій розраховували на основі загального кальцію в сироватці крові та загального білка. Скориговані рівні загального кальцію в сироватці крові (cTCa) розраховували за допомогою альбуміну та загального рівня кальцію в сироватці крові. У випадку пухлинних тканин та інтактної шкіри кальцій визначали фізичними методами аналізу: інструментальним аналізом нейтронної активації (INAA), індукованим протоном рентгенівським випромінюванням (PIXE). Інтактний ПТГ вимірювали за допомогою ІФА.

Результати
Поширеність незалежної гіперкальціємії ПТГ низька у пацієнтів із ССС (1,21%). Прояви гіперкальціємії багаторазові і включають: травні, ниркові, нервово-м’язові та серцево-судинні порушення. У цих пацієнтів інтактний ПТГ (iPTH) є нормальним, кальцію в сечі низький, альбуміну в сироватці низький, а кальцій у тканині пухлини значно підвищений порівняно зі здоровою тканиною.

висновки
PTH-незалежна гіперкальціємія має низьку поширеність у пацієнтів із SCC. Гіперкальціємія корелює з вірогідністю розвитку метастазів у пацієнтів із ССС. Одним із можливих механізмів може бути гіперсекреція PTHrp злоякісними кератиноцитами.

Ключові слова
гіперкальціємія, ПТГ, плоскоклітинний рак шкіри

Вступ
Останнім часом стає все більш очевидним, що шкіра має метаболічні та ендокринні властивості. Здатність шкіри функціонувати як нейроендокринний орган є відносно новим поняттям у біології шкіри. Клінічні спостереження за різними ендокринними розладами, пов’язаними з шкірними проявами, підтверджують думку про те, що шкіра може бути мішенню для нейроендокринних сигналів.
Конкретні тенденції досліджень у цій галузі зосереджені на: (i) гормонах та нейромедіаторах шкіри; (ii) характеристика рецепторів, що відповідають шкірі;
(iii) ідентифікація шляхів передачі сигналу.

Шкіра виробляє: PTHrp, CRH, урокортин, ACTH, α-MSH, β-MSH, β-ендорфіни, Y3-MSH, пролактин, гормон росту, нейропептиди (енкефаліни, тахікініни, SP та NKA, CGRP, VIP, NPY, соматостатин, Галанін, ANP, PHI, гістидин-метіонін-пептид, гістидин-ізолейцин-пептид, брадикінін, холецистокінін, GRP), нейротрофіни (NGF, NT-3, NT-4, BDNF), нейромедіатори та нейрогормони (пролактин, ацетилат) DOPA, серотонін, глутамат, аспартат, мелатонін), ТТГ, Т3, Т4, стероїдні гормони (DHEA, 4-андростендіон, тестостерон, ДГТ, естрон, естрадіол, глюкокортикоїди, прогестерон), медіатори вазодилатації та ангіогенезу, протизапальні хемоаттрактанти, фактори росту, лейкотрієни, простагландини, оксид азоту, фактор стовбурових клітин, VEGF. Шкіра містить багату мережу рецепторів: рецептори CRH/урокортину, рецептори меланокортину, опіоїдні рецептори, GHR, пролактин, рецептори LH та hCG, рецептори нейрокініну, PTH-R та PTHrp-R, рецептори вітаміну D, глюкокортикоїди та рецептори гормонів мінералокортикоїдів, рецептори для андрогенів та естрогенів, серотонінергічних рецепторів, холінергічних та адренергічних рецепторів, пуринорецепторів.

Незважаючи на те, що існує багато сигнальних молекул, механізми розпізнавання та передачі сигналів обмежені, і лише деякі значною мірою присутні у всіх видів. Метою цього дослідження є визначення ендокринних та метаболічних властивостей шкіри у випадках ПТГ-незалежної гіперкальціємії у пацієнтів з немеланомним раком шкіри (НМСК).
Завданнями є:
(i) оцінка взаємозв'язку між агресією пухлини та розвитком гіперкальціємії у пацієнтів з НМСК;
(ii) виявлення клінічних, функціональних та біологічних змін, спричинених цим станом;
(iii) перерозподіл кальцію з позаклітинних рідин у внутрішньоклітинні відділи;
(iv) опис кількох молекулярних аспектів щодо механізму виникнення гіперкальціємії.

Матеріали і методи
Навчальні групи
Це дослідження було проведено в період з січня 2000 року по травень 2009 року на основі спеціального протоколу. З загальної кількості 1232 випадків ми оцінили 32 пацієнта з КА (середній вік 46,12 ± 8,6 років, жінки: чоловіки = 14:18), 468 пацієнтів з базаліомою (ОЦК; середній вік 51,68 ± 7,3 року, жінки: чоловіки = 239: 229), 412 пацієнтів з плоскоклітинним раком (СКК) (середній вік 53,17 ± 6,4 років, жінки: чоловіки = 197: 215) та 320 здорових добровольців (середній вік 46,15 ± 11,2 року, жінки: чоловіки = 166: 154).

Критерії виключення
Пацієнти з ПТГ-залежною гіперкальціємією та сімейною гіпокалькуріальною гіперкальціємією, гіперкальціємією, залежною від вітаміну D гіперкальціємією (саркоїдоз, інтоксикація вітаміном D), ті з підвищеним виведенням старої кісткової маси (гіперпаратиреоз, іммобілізація) не були включені в це дослідження. пацієнти, які використовують такі ліки, як діуретики та тіазиди, а також пацієнти з хронічною нирковою недостатністю (вторинний гіперпаратиреоз, отруєння алюмінієм). Випадків виключення за невідповідність пацієнта не було.

Критерії включення
У це дослідження були включені пацієнти, які відповідали клінічним та морфопатологічним критеріям діагностики: кератоакантома, ОЦК та ССС. Усі пацієнти пройшли клінічне та параклінічне обстеження (гематологія, біохімія, імунологічні тести).

Наближення до пацієнта з гіперкальціємією
Після біохімічного підтвердження гіперкальціємії та виключення можливостей помилки (гемоконцентрація, гіперпротеїнемія, гемоліз, лактація, гіпербілірубінемія, гіперфосфатемія) проводиться диференціальний діагноз між первинним гіперпаратиреозом та злоякісними пухлинами. Пацієнтам, у яких діагностовано гіперкальціємію, проводили ендокринні тести (інтактний ПТГ), електрокардіографію та візуалізацію (рентгенологія, УЗД, КТ, МРТ).

Усі пацієнти погодились з Гельсінкською декларацією перед тим, як бути включеними в це дослідження.

Методологія
За допомогою спектрофотометричних методів ми вимірювали загальний кальцій у сироватці крові (TCa). Ми розрахували іонізований кальцій на основі TCa та загальних білків сироватки крові (TP) за цією формулою:
-Ca2 + (6 x TCa-TP/3)/(6 + TP)
Скориговані рівні загального кальцію в сироватці крові (cTCa):
-cTCa (ммоль/л), виміряний TCa (ммоль/л) + 0,02 х (40 - альбумін) (г/л)
Фізичними методами аналізу (INAA, PIXE) вимірювали кальцій із тканини. iPTH визначали методом ІФА.

Результати
У групах КА або ОЦК не спостерігалося збільшення кальцію більше ніж 2,6 мм/л. Гіперкальціємія була у п'яти випадках (1,21%) СКК. У цих пацієнтів рівень інтактного паратиреоїдного гормону в нормі, а альбумін у сироватці крові низький. Іонізований кальцій у концентраціях вище 1,29 ммоль/л був присутній у шести (1,45%) випадках SCC та одному випадку BCC (0,21%).
Виведення кальцію з сечею не суттєво відрізнялося між пацієнтами та контрольними групами. У будь-якому випадку кальцій у сечі не перевищував 7,5 ммоль/24 год.

Середні рівні іонізованої сироватки та кальцію в сечі не показали суттєвих відмінностей між групами. Підвищена концентрація кальцію спостерігалася в тканині пухлини. Клінічними ознаками надлишку кальцію, як правило, виявляються у пацієнтів з PTH-незалежною гіперкальціємією, є: ніктурія (три випадки), полідіпсія (один випадок), поліурія (чотири випадки), втома (п’ять випадків), втрата ваги (три випадки), головний біль (чотири випадки), дратівливість (два випадки), сплутаність свідомості (один випадок), труднощі з концентрацією уваги (п’ять випадків), біль у животі (три випадки) та м’язова слабкість (два випадки).
Найважливіші дисфункції, що спостерігаються у СКК, у пацієнтів з гіперкальціємією ПТГ - незалежність: гіпертонія (три випадки), зниження остеотендинових рефлексів (два випадки), укорочення QT та підвищення рівня PR на ЕКГ (два випадки).
Клінічні та візуалізаційні дані Coreland для пацієнтів із SCC та PTH гіперкальціємією - незалежні.
Що стосується лікування пацієнтів, вони мали різні схеми лікування основного захворювання та ускладнень.

Таблиця 1
Загальний рівень кальцію (ммоль/л сироватки) та іонізованого кальцію (ммоль/л сироватки) у пацієнтів з немеланомою проти раку шкіри. контролювати пацієнтів.

Кальцій КА (32 випадки) ОЦК (468 випадків) SCC (412 випадків) Контроль (320 випадків)

Загальний вміст Ca (ммоль/л) 2,6 0 0 5 0
Як іонізований
(ммоль/л) 1,29 0 1 6 0

Таблиця 2
Рівні IPTH у пацієнтів з гіперкальціємією
Загальна кількість пацієнтів Ca (ммоль/л сер) ПТГ інтактна (пг/мл) Альбумін (г/л сер) cTCa (ммоль/сер)
1 2,84 21,0 2,69 3,10
2 2,95 18,0 2,90 3,12
3 3,02 20,5 2,47 3,22
4 2,86 22,0 3,01 3,05
5 3,11 9,0 2,38 3,13

Таблиця 3
Рівень кальцію в сечі (ммоль/24 год) у пацієнтів з немеланомним раком шкіри проти контролювати пацієнтів

Кальцій у сечі
ммоль/24 год КА (16 випадків) ОЦК (73 випадки) SCC (104 випадки) Контроль (83 випадки)
7,5 0 1 0 1

Таблиця 4
Рівень сироватки та кальцію в сечі (ммоль/л сироватки) у пацієнтів з немеланомним раком шкіри проти. контролювати пацієнтів

Параметр KA BCC SCC Control

Всього Ca
(ммоль/л сер) 2,34 ± 0,5 2,39 ± 0,42 2,43 ± 0,35 2,5 ± 0,60
Як іонізований
(ммоль/л сер) 1,24 ± 0,06 1,16 ± 0,08 1,25 ± 0,04 1,23 ± 0,03
Кальцій у сечі
ммоль/24 год 5,3 ± 1,60 5,2 ± 1,51 4,9 ± 1,82 4,8 ± 1,63

Таблиця 5
Швидкість концентрації кальцію в тканині (пухлинна тканина/здорова тканина) при немеланомних проліфераціях шкіри

Метод вимірювання кальцію KA/здорові тканини BCC/здорові тканини SCC/здорові тканини
INAA (ppb) 1,94 3,11 1,71
PIXE (ppm) 1,18 3,38 1,33

Загалом, наші результати показали, що:

1. Гіперкальціємічний синдром має низьку поширеність у пацієнтів із СКК (1,21%);
2. Виникнення та прогресування травних, серцево-судинних та неврологічних ускладнень нирок часто зустрічається у пацієнтів із ССС та незалежною гіперкальціємією ПТГ;
3. Наявність гіперкальціємії пов'язана зі схильністю до розвитку метастазів у СКК;
4. Механізми, що беруть участь у розвитку гіперкальціємії, є складними і включають гіперсекрецію PTHrp пухлинними клітинами.

Ми вдячні доктору Константину Чортеа та доктору Марілені Кьортеа за підтримку в технічній допомозі щодо фізичних методів аналізу кальцію в тканинах. Цей документ був схвалений Комітетом з етики Центру/Клінічної лікарні дерматовенерології «Проф. Доктор Скарлат Лонгін »з Бухареста.

автори:
І. Ніколае, С. Шипор
Департамент біохімії, Дерматовенерологічний центр, Бухарест, Румунія
Науково-дослідний відділ Національного інституту ендокринології “C.I. Пархон ”, Бухарест, Румунія

1. S1ominski A, Wortsman J. Endocr Rev 2000; 21: 457-487.
2. Dirk R, Goerge T, Schneider S. Нейрональний контроль функції шкіри: шкіра як нейроімуноендокринний орган. Physiol Rev 2006; 86: 1309-1379.